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BCA法蛋白質(zhì)含量測定試劑盒(分光光度法 50T/48S)

貨號 SH0625 售價(元) 144
規(guī)格 50T/48S CAS號
  • 產(chǎn)品簡介
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貨號

名稱

規(guī)格

存儲

SH0625

BCA法蛋白質(zhì)含量測定試劑盒(分光光度法 50T/48S)

50T/48S

4℃

 

正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。

測定意義:

樣品可溶性蛋白質(zhì)含量常常用于酶活性計算。此外,可溶性蛋白質(zhì)含量也用于食品等質(zhì)量分析。

測定原理:

堿性條件下,蛋白質(zhì)中半胱氨酸、胱氨酸、色氨酸、酪氨酸以及肽鍵,能將Cu2+還原成Cu+ ;2分子的BCA與Cu+ 結(jié)合,生成紫色絡(luò)合物,在540-595nm有吸收峰,562nm處吸收峰最強(qiáng)。

自備儀器和用品:

臺式離心機(jī)、恒溫水浴鍋、可見分光光度計、移液器、1ml玻璃比色皿和蒸餾水。

組成:

產(chǎn)品名稱

SH0625-50T/48S

Storage

試劑A:液體

60ml

4℃

試劑B:液體

1.2ml

4℃

標(biāo)準(zhǔn)蛋白:液體

2ml

4℃

說明書

一份

工作液配制:臨用前請根據(jù)擬用工作液體積(樣本數(shù)×1ml),將試劑A和B按照50:1的比例混合,蓋緊后充分混勻。

樣品中可溶性蛋白質(zhì)提?。?/b>

1、液體樣品:澄清無色液體樣品可以直接測定。

2、組織樣品:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液)自備,根據(jù)需要選用酶提取緩沖液或者蒸餾水或者生理鹽水

   冰浴勻漿,8000g,4℃離心10min,取上清,即待測液。

3、細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104 個):細(xì)菌、細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量(104 個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1ml提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300W,超聲3秒,間隔7秒,總時間3分鐘);然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。

測定步驟:

1. 分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長到562nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 工作液置于60℃水浴預(yù)熱30min.

 

空白管

標(biāo)準(zhǔn)管

測定管

蒸餾水(μl)

20

 

 

標(biāo)準(zhǔn)品(μl)

 

20

 

待測液(μl)

 

 

20

工作液(μl)

1000

1000

1000

混勻后置于60℃保溫30min,于1ml比色皿在562nm處測定吸光值A(chǔ),分別記為A空白管、A標(biāo)準(zhǔn)管、A測定。

 

注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需要做一次

 

 

 

 

計算公式:

Cpr(mg/ml)= C標(biāo)準(zhǔn)品×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)

          = 0.5×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)

Cpr(mg/g)= C標(biāo)準(zhǔn)品×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷W

         = 0.5×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷W

W:樣本質(zhì)量,g

 

注意事項:

BCA法蛋白質(zhì)含量測定試劑盒,適用于測定蛋白濃度在20-5000μg/ml樣品。測定前取1-2個樣做預(yù)實驗,若A測定管-A空白管>1.5,需將樣本用提取液稀釋后再測定,以確保測定的準(zhǔn)確性。

 

 

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