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雙縮脲法蛋白含量測定系列試劑盒（微量法100T/96S）
| 貨號 | SH0624 | 售價（元） | 144 |
| 規(guī)格 | 100T/96S | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0624 |
雙縮脲法蛋白含量測定系列試劑盒（微量法100T/96S） |
100T/96S |
測定意義：
樣品可溶性蛋白質(zhì)含量常常用于酶活性計算。此外，可溶性蛋白質(zhì)含量也用于食品等質(zhì)量分析。
測定原理：
強堿性溶液中，雙縮脲與CuSO4形成紫色絡(luò)合物；紫色絡(luò)合物顏色的深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比，而與蛋白質(zhì)分子量及氨基酸成分無關(guān)，故可用來測定蛋白質(zhì)含量。該方法測定范圍為1~10mg蛋白質(zhì)，適用于蛋白質(zhì)濃度高的樣品，尤其是動物材料。
組成：
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產(chǎn)品名稱 |
PSH0624-100T/96S |
Storage |
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試劑一：液體 |
20ml |
4℃ |
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標準品：液體 |
1ml |
4℃ |
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說明書 |
一份 |
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標準品：液體1ml×1瓶，5 mg/ml，4℃保存。
自備儀器和用品：
離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、移液器和蒸餾水。
樣品中可溶性蛋白質(zhì)提取提?。?/span>
1、液體樣品：澄清無色液體樣品可以直接測定。
2、組織樣品：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液（自備，根據(jù)需要選用酶提取緩沖液或者蒸餾水或者生理鹽水））
冰浴勻漿，8000g，4℃離心10min，取上清，即待測液。（動物樣品常常需要稀釋）
3 、細菌、真菌：按照細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1ml提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后8000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測。
測定操作：
1. 分光光度計/酶標儀預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長到540 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 空白管：取0.5mL EP管，加入40μl蒸餾水，200μl試劑一，混勻后室溫靜置15 min，取200μl于微量玻璃比色皿/96孔板，540nm比色，記為A空白管。
3. 標準管：取0.5mL EP管，加入40μl標準液，200μl試劑一，混勻后室溫靜置15 min，取200μl于微量玻璃比色皿/96孔板，540 nm比色，記為A標準管。
4. 測定管：取0.5mL EP管，加入40μl待測液，200μl試劑一，混勻后室溫靜置15 min，取200μl于微量玻璃比色皿/96孔板，540nm比色，記為A測定管。
注意：空白管和標準管只需測定一次。
樣品中蛋白質(zhì)濃度計算公式:
C待測（mg/ml）= C標準管×(A測定管－A空白管)÷(A標準管－A空白管)
=5×(A測定管－A空白管)÷(A標準管－A空白管)
注意事項:
1.樣品蛋白濃度須在1～10mg/ml范圍內(nèi)，低于1mg/ml不能用此法，高于10mg/ml須做相應(yīng)稀釋。因此測定前用1～2個樣做預(yù)實驗，確保蛋白濃度在1～10mg/ml范圍內(nèi)。
2.待測樣品蛋白提取可用生理鹽水、雙蒸水或不含蛋白的PBS提取。該法受硫酸銨、Tris緩沖液干擾，提取液中應(yīng)不含這些物質(zhì)；否則改用BCA蛋白質(zhì)含量測定試劑盒。