日本无码人妻丰满熟妇5g影院,人妻无码一区二区,国产精品一区二区在线播放,精品国产乱码久久久久久蜜柚,亚洲AV无码成人精品

歡迎蒞臨南京沃博生物科技有限公司官方網(wǎng)站!

異檸檬酸裂解酶(ICL)檢測試劑盒(微量法 100T/96S)

貨號 SH0410 售價(元) 1860
規(guī)格 100T/96S CAS號
  • 產(chǎn)品簡介
  • 相關產(chǎn)品

貨號

名稱

規(guī)格

SH0410

異檸檬酸裂解酶(ICL)檢測試劑盒(微量法 100T/96S)

100管/96樣

正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定                                             

測定意義:

ICLEC4.1.3.1)主要存在于植物和微生物中,油料作物種子在萌發(fā)過程中,通過乙醛酸循環(huán)及其他過程將脂肪轉(zhuǎn)變成碳水化合物。ICL是乙醛酸循環(huán)的關鍵酶之一。

測定原理:

ICL催化異檸檬酸降解為乙醛酸和琥珀酸,乙醛酸和NADHLDH的作用下生成乙醇和NAD,NADH340nm下有特征吸收峰,監(jiān)測340nm吸光度的減小速率可間接反應ICL活性。

試劑組成和配制:

產(chǎn)品名稱

SH0410-100T/96S

Storage

提取液:液體

100ml

4℃

試劑一:液體

15ml

4℃

試劑二:粉劑

1

-20

試劑三:液體

360μl

4

試劑:粉劑

1

4℃

說明書

一份

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水

樣本的前處理:

1、細菌或培養(yǎng)細胞:

先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量(104個):提取液體積(ml)為500~10001的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);15000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2、組織:

按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。15000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

測定步驟:

1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至340nm,蒸餾水調(diào)零。

2、樣本測定

1)工作液的配置,將試劑二和試劑三轉(zhuǎn)移至試劑一中,充分混合溶解,置于37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)水浴5min;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融;

2)在試劑四中加入4ml蒸餾水,充分溶解待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融;

3)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μl樣本、150μl工作液和40μl試劑四,混勻,立即記錄340nm20s時的吸光值A12min20s后的吸光值A2,計算ΔA=A1-A2

ICL活性計算:

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

1)按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:每mg組織蛋白中每分鐘消耗1 nmolNADH定義為一個酶活力單位。

ICLnmol/min/mg prot=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(V×Cpr) ÷T=1608×ΔA÷Cpr

2)按樣本鮮重計算:

單位的定義:每g組織每分鐘消耗1 nmolNADH定義為一個酶活力單位。

ICLnmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(W× V÷V樣總) ÷T=1608×ΔA÷W

3)按細菌或細胞密度計算:

單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘消耗1 nmolNADH定義為一個酶活力單位。

ICLnmol/min/104 cell=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(500×V÷V樣總) ÷T=3.215×ΔA

V反總:反應體系總體積,2×10-4 L;εNADH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cmd:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.01 ml;V樣總:加入提取液體積,1 mlT:反應時間,2 minCpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mlW:樣本質(zhì)量,g;500:細菌或細胞總數(shù),500萬。

b.96孔板測定的計算公式如下

1)按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:每mg組織蛋白中每分鐘消耗1 nmolNADH定義為一個酶活力單位。

ICLnmol/min/mg prot=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(V×Cpr) ÷T=3216×ΔA÷Cpr

2)按樣本鮮重計算:

單位的定義:每g組織每分鐘消耗1 nmolNADH定義為一個酶活力單位。

ICLnmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(W ×V÷V樣總) ÷T=3216×ΔA÷W

3)按細菌或細胞密度計算:

單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘消耗1 nmolNADH定義為一個酶活力單位。

ICLnmol/min /104 cell=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(500×V÷V樣總) ÷T=6.25×ΔA

V反總:反應體系總體積,2×10-4 L;εNADH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d96孔板光徑,0.5cm;V樣:加入樣本體積,0.01 ml;V樣總:加入提取液體積,1 ml;T:反應時間,2 minCpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml;W:樣本質(zhì)量,g500:細菌或細胞總數(shù),500萬。

久久天天躁狠狠躁夜夜av | 岛国大片在线免费观看 | 特黄少妇无码AA级毛片 | 少妇BBBBBB高潮A片 | 久久人妻少妇嫩草av蜜桃 | ThePorn精品无码 | 国产一区二区三区在线免费观看 | 強暴女警AV正片一区二区三区 | 亚洲中文字幕精华在线看 | 免费毛片高潮一级一级 | 性爱动态小视频免费试看 | 美女高潮吹水黄色视频 | 搡80老女人老太婆视频在线观看 | 国产免费网站无码观看 | 性夜黄A片爽爽爽免费视 | 亚洲喷水自慰国产高潮 | 亚洲天堂在线免费观看视频 | 性猛交乱婬AV大片三級韩国理伦 | 高清在线播放无码 | 日本大片免aaa费观看视频 | jeppesen五十路亂倫 | 国产精品凹凸777777 | 久久丰满人妻一区二区 | 白丝校花自慰一区二区 | 国产欧美熟妇另类久久久 | 99re国产口爆吞精 | A毛片免费精品一区二区三区 | 黄色视频在线免费无码观看 | 国产精品一级AV片免费看 | 波多野结衣黄色视频 | 处一女一乱一乱一视频 | 国产精品农村妇女AAAA | 国产一级a毛一级a看高清视视频 | 亚洲熟妇自拍偷拍另欧美一百度一百度 | 蜜桃av鲁一鲁一鲁一鲁俄罗斯的 | 免费无码国产在线观看 | 精品国产AV色一区二区 | 国产无码高清在线播放 | 白丝女疯狂 喷水自慰爽 | 久久成人麻豆精品一牛影视 | 国产色情无码A片爆乳直播 91人妻无码成人精品一区 |