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谷氨酸（Glu）檢測試劑盒（可見分光50T/48S）
| 貨號 | SH0147 | 售價（元） | 384 |
| 規(guī)格 | 50T/48S | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0147 |
谷氨酸（Glu）檢測試劑盒（分光光度法50T/48S） |
50T/48S |
測定意義：
Glu廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，不僅是組成蛋白質(zhì)的20種氨基酸之一，而且通過轉(zhuǎn)氨基作用參與多種氨基酸合成，是生物體內(nèi)主要氨基來源之一。此外，Glu還是味精的主要有效成分，常用做食品添加劑以及香料生產(chǎn)。
測定原理：
利用專用提取液提取，然后用顯色劑進行顯色，顯色后在570nm下進行測定。
組成：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0147-50T/48S |
Storage |
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試劑一：液體 |
100ml |
4℃ |
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試劑二：粉劑 |
1瓶 |
4℃ |
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說明書 |
1份 |
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試劑二臨用前加入10ml蒸餾水，充分混勻溶解，用不完的試劑仍 4℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水。
谷氨酸提?。?/span>
1、細菌或培養(yǎng)細胞樣品：先收集細菌或細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：試劑一體積（ml）為500~1000：1的比例（建議1000萬細菌或細胞加入2ml試劑一），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 常溫離心10min，取上清，置冰上待測。
2、組織樣品：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.2g組織，加入2ml試劑一），進行冰浴勻漿。8000g 常溫離心10min，取上清，置冰上待測。
3、血清（漿）或細胞培養(yǎng)液樣品：按照血清（漿）或細胞培養(yǎng)液體積（ml）：試劑一體積(ml)為1：5~10的比例（建議取0.2ml血清（漿）或者細胞培養(yǎng)液加入2ml試劑一），進行冰浴勻漿。8000g 常溫離心10min，取上清，置冰上待測。
測定步驟：
1、分光光度計預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至570nm，蒸餾水調(diào)零。
2、在有蓋EP管中加入下列試劑：
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試劑名稱（μl） |
測定管 |
對照管 |
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樣本 |
1000 |
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試劑一 |
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1000 |
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試劑二 |
200 |
200 |
混勻，90℃水浴20min（蓋緊，以防止水分散失），流水冷卻，于570nm波長處比色，△A=A測定管-A對照管。對照管只要做一管。
谷氨酸含量計算：
1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測定回歸方程為y = 0.0074x- 0.5255；x為谷氨酸含量（μg/ml），y為吸光值。
2、按照血清（漿）或者細胞培養(yǎng)液體積計算
谷氨酸含量(μg/ml)= [(△A +0.5255)÷0.0074×V1]÷(V3×V1÷V2）=1351×(△A+0.5255)
3、按照蛋白濃度計算
谷氨酸含量(μg/mg prot)=[(△A +0.5255)÷0.0074×V1]÷(V1×Cpr)=135.1×(△A+0.5255) ÷Cpr
4、按照樣本質(zhì)量計算
谷氨酸含量(μg/g鮮重)=[(△A +0.5255)÷0.0074×V1]÷(W ×V1÷V2)=270.2×(△A+0.5255) ÷W
5、按照細菌或細胞密度計算
谷氨酸含量(μg/104 cell)=[(△A +0.5255)÷0.0074×V1]÷(1000×V1÷V2)=0.27×(△A+0.5255)
V1：加入反應(yīng)體系中樣本體積，1ml；V2：加入提取液體積，2 ml；V3：加入血清（漿）或細胞培養(yǎng)液體積，0.2 ml； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；W：樣本質(zhì)量，g；1000：細菌或細胞總數(shù)，1000萬。
注意：
1、該試劑盒僅適用于發(fā)酵液或組織中谷氨酸含量測定，檢測下限為100μg/ml。
2、標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍為：100μg/ml -600μg/ml。
3、ΔA線性范圍為：0.01-2；若大于2則需要將上清液用試劑一稀釋至適當(dāng)倍數(shù)后測定，計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。