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土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)檢測試劑盒(50T/24S)

貨號 SH0339 售價(元) 840
規(guī)格 50T/24S CAS號
  • 產(chǎn)品簡介
  • 相關產(chǎn)品

貨號

名稱

規(guī)格

SH0339

土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)檢測試劑盒(分光光度法50T/24S)

50管/24樣

正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定                                             

測定意義:

S-NAG是溶酶體中的一種酸性水解酶,由土壤微生物分泌。S-NAG活性變化與機體某些病理狀態(tài)密切相關。

測定原理:

S-NAG分解β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成對-硝基苯酚,后者在400nm有最大吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計算NAG活性。

試劑組成和配制:

產(chǎn)品名稱

SH0339-50T/24S

Storage

試劑一:甲苯

5ml(自備)

4℃

試劑二:粉劑

2

-20

試劑三:液體

25ml

4℃

試劑:液體

50ml

4℃

說明書

一份

試劑二:粉劑×2瓶,-20℃保存;臨用前每瓶加入6ml蒸餾水,充分溶解備用,用不完的試劑仍-20℃保存。

自備儀器和用品:

可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1ml玻璃比色皿、甲苯(不允許快遞)和蒸餾水。

樣品處理:

新鮮土樣自然風干或37度烘箱風干,過30~50目篩。

測定步驟:

試劑名稱

測定管

對照管

風干土樣(g

0.05

0.05

試劑一(μl

25

25

 

室溫振蕩混勻15min

90℃振蕩混勻15min

試劑二(μl

400

 

蒸餾水(μl

 

400

試劑三(μl

500

500

混勻, 37℃振蕩反應1h后,立即90℃水浴5min(蓋緊,防止水分散失),流水冷卻10000g 25℃離心10min,取上清液。

上清液μl

500

500

試劑四μl

1000

1000

充分混勻,室溫靜置2min后,400nm處蒸餾水調零,測定吸光值A,計算ΔA=A測定管-A對照管。每個測定管設一個對照管。

S-NAG活力計算

標準條件下測定的回歸方程為y = 0.00645x -0.0054x為標準品濃度(μmol/L),y為吸光值。

單位的定義:每天每g土樣中產(chǎn)生1 μmol-硝基苯酚定義為一個酶活力單位。

S-NAG活力(μmol/d/g 土樣)= (ΔA+0.0054) ÷0.00645×V反總÷W÷T =68.84×(ΔA+0.0054)

T:反應時間,1h=1/24d; V反總:反應體系總體積:9.25×10-4 L;W:樣本質量,0.05g。

 

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