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支鏈淀粉檢測試劑盒(微量法 100T/96S)

貨號 SH0288 售價(元) 1920
規(guī)格 100T/96S CAS號
  • 產(chǎn)品簡介
  • 相關產(chǎn)品

貨號

名稱

規(guī)格

SH0288

支鏈淀粉檢測試劑盒(微量法 100T/96S)

 100T/96S

正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義:

鏈淀粉是具有高度分支的多糖,淀粉中直鏈淀粉和支鏈淀粉的比例和含量對淀粉產(chǎn)品的加工、物化特性、糊化溫度等有著直接的影響,對于不同比例直、支鏈淀粉的淀粉的研究具有重要的意義。

測定原理:

利用80%乙醇可以把樣品中可溶性糖與淀粉分開,利用雙波長比色法測定支鏈淀粉含量。

組成:

組分名稱

SH0288-100T/96S

Storage

試劑一:液體

100ml

4℃

     試劑二:乙醚(自備)

100ml

4℃

試劑三:液體

100ml

4℃

試劑四:液體

2ml

4℃

試劑五:液體

300μl

4℃

說明書

一份

 

自備儀器和用品:

酶標儀/可見分光光度計、水浴、可調式移液器、96孔板/微量石英比色皿、研缽、冰、乙醚和蒸餾水。

淀粉提?。?/span>  

稱取0.01~0.02g烘干樣本(建議稱取約0.01g)于研缽中研碎,加入1ml試劑一,充分勻漿后轉移到EP管中,80℃水浴提取30min,3000g,25℃離心5min,棄上清,留沉淀,加入1ml試劑二(乙醚)振蕩5min,3000g25℃離心5min,棄上清,留沉淀,加入1ml試劑三充分溶解,90℃水浴10min,冷卻后待測。

測定步驟:

分光光度計或酶標儀預熱30min以上,蒸餾水調零。

測定管:在96孔板或微量石英比色皿中依次加入20uL樣本, 14uL試劑四,120uL蒸餾水,2uL試劑五,44uL蒸餾水,混勻,分別測定550743nm處吸光值,ΔA測定=A550-A743。

空白管:在96孔板或微量石英比色皿中依次加入20uL試劑三, 14uL試劑四,120uL蒸餾水,2uL試劑五,44uL蒸餾水,混勻,分別測定550743nm處吸光值,ΔA空白=A550-A743。

支鏈淀粉含量計算:

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標準條件下測定的回歸方程為y=0.1214x+0.0076x為標準品濃度(mg/ml),y為吸光值。

1、按照蛋白濃度計算

支鏈淀粉含量(mg/mg prot)=[(ΔA測定-ΔA空白-0.0076)×V1]÷0.1214 ÷(V1×Cpr)=8.24×(ΔA測定-ΔA空白-0.0076) ÷Cpr

2、按樣本干重計算

支鏈淀粉含量(mg/g干重)= [(ΔA測定-ΔA空白-0.0076)×V1] ÷0.1214÷(W×V1÷V2) =8.24×(ΔA測定-ΔA空白-0.0076) ÷W

V1:加入反應體系中樣本體積,0.02ml;V2:加入提取液體積,1 ml;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/ml;W:樣本質量,g

b.96孔板測定的計算公式如下

標準條件下測定的回歸方程為y= 0.0607x+0.0076;x為標準品濃度(mg/ml),y為吸光值。

1、按照蛋白濃度計算

支鏈淀粉含量(mg/mg prot)=[(ΔA測定-ΔA空白-0.0076)×V1]÷0.0607 ÷(V1×Cpr)=16.47×(ΔA測定-ΔA空白-0.0076) ÷Cpr

2、按樣本干重計算

支鏈淀粉含量(mg/g干重)= [(ΔA測定-ΔA空白-0.0076)×V1] ÷0.0607÷(W×V1÷V2) =16.47×(ΔA測定-ΔA空白-0.0076) ÷W

V1:加入反應體系中樣本體積,0.02ml;V2:加入提取液體積,1 ml;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/ml;W:樣本質量,g

最低檢測限為10mg/g干重或0.1mg/mgprot。

 

 

 

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