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β-葡萄糖醛酸苷酶(β-GD)檢測試劑盒(分光光度法 50T/48S)

貨號 SH0188 售價(元) 600
規(guī)格 50T/48S CAS號
  • 產(chǎn)品簡介
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貨號

名稱

規(guī)格

SH0188

β-葡萄糖醛酸苷酶(β-GD)檢測試劑盒(分光光度法 50T/48S)

50管/48樣

正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定                                             

測定意義:

β-GD廣泛存在于動物組織中,是一種參與腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移過程的基質(zhì)降解酶,具有水解固醇葡萄糖醛酸和酸性粘多糖等生理功能。該酶在肝細(xì)胞中含量較高。此外在胃癌組織中含量豐富,測定胃液β-GD活性對于研究胃癌具有重要的意義。

測定原理:

β-GD催化苯酚 β-D-葡萄糖醛酸產(chǎn)生游離的酚酞,通過測定苯酚含量反應(yīng)該酶活性高低。

組成:

產(chǎn)品名稱

SH0188-50T/48S

Storage

提取液:液體

60ml

4℃

試劑一:液體

5ml

4℃

試劑二:粉劑

1

-20℃

試劑三:液體

37.5ml

4℃

試劑:液體

10ml

4℃

說明書

一份

試劑二:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入5ml蒸餾水,充分溶解待用;用不完的試劑仍-20℃保存;

試劑四:1μmol/ml標(biāo)準(zhǔn)儲備液10ml,4℃保存;

自備儀器和用品:

可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

樣品測定的前處理

按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

測定步驟

1、分光光度計預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至540nm,蒸餾水調(diào)零。

2、樣本測定(在EP管中加入下列試劑)

試劑名稱(μl

加樣孔

測定管

標(biāo)準(zhǔn)管

空白管

試劑一

100

100

100

試劑二

100

100

100

樣本

50

 

 

1μmol/ml標(biāo)準(zhǔn)液

 

50

 

蒸餾水

 

 

50

     混勻后,37℃水浴30min

試劑三

750

750

750

混勻, 540nm下測定各管吸光值

注意:標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需測一次。

β-GD活性計算

1)按樣本鮮重計算:

單位定義:每小時每g鮮重樣品中催化產(chǎn)生 1μmol酚酞的量為一個活力單位。

β-GDμmol/h/g 鮮重)= (C標(biāo)準(zhǔn)管×V1)×A測定管-A空白管)÷A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷(W×V1÷V2)÷T=2×A測定管-A空白管)÷A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷W

2)按樣本蛋白濃度計算:

單位定義:每小時每mg組織蛋白催化產(chǎn)生 1μmol酚酞的量為一個活力單位。

β-GDμmol/h /mg prot= (C標(biāo)準(zhǔn)管×V1)×A測定管-A空白管)÷A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷(V1×Cpr)÷T=2×A測定管-A空白管)÷A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷Cpr

C標(biāo)準(zhǔn)管:標(biāo)準(zhǔn)管濃度, 1μmol/ml;V1:加入樣本體積:0.05ml;V2:加入提取液體積,1ml;T:反應(yīng)時間,0.5h;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml;W:樣本鮮重,g

 

 

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