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賴氨酸檢測試劑盒（微量法 100T/96S）
| 貨號 | SH0154 | 售價（元） | 1296 |
| 規(guī)格 | 100T/96S | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0154 |
賴氨酸(lysine，Lys)含量測定試劑盒（微量法 100T/96S） |
100管/96樣 |
正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義：
賴氨酸是人體必需氨基酸之一，能促進(jìn)人體發(fā)育、增強(qiáng)免疫功能，并有提高中樞神經(jīng)組織功能的作用。賴氨酸為堿性必需氨基酸。由于谷物食品中的賴氨酸含量甚低，且在加工過程中易被破壞而缺乏，故稱為第一限制性氨基酸。
測定原理：
蛋白質(zhì)中的賴氨酸具有一個游離的ε-NH2，它與茚三酮試劑反應(yīng)生成藍(lán)紫色物質(zhì)，其顏色的深淺在一定范圍內(nèi)與賴氨酸的含量成線性關(guān)系。亮氨酸與賴氨酸的碳原子數(shù)目相同，而且僅有—個游離氨基(ε-NH2)，所以通常用亮氨酸配制標(biāo)準(zhǔn)液。
組成：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0154-100T/96S |
Storage |
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提取液：液體 |
100ml |
4℃ |
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試劑一：粉劑 |
1瓶 |
4℃ |
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試劑二：液體 |
12.5ml |
4℃ |
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試劑三：液體 |
15ml |
4℃ |
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試劑四：60%乙醇（自備） |
1瓶 |
4℃ |
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說明書 |
1份 |
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自備儀器和用品：
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水、水浴鍋。
賴氨酸提?。?/span>
樣本烘干粉碎，稱取約0.01g樣本，加入1ml提取液，充分勻漿。80℃水浴提取20min，冷卻后10000g離心10min，取上清待測。
測定步驟：
1、分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至570nm，蒸餾水調(diào)零。
2、工作液的配制：取10ml試劑一與10ml試劑二混合搖勻，取上清備用。用不完的試劑4℃保存。
3、在有蓋EP管中加入下列試劑：
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試劑名稱（μl） |
測定管 |
空白管 |
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樣本 |
100 |
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提取液 |
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100 |
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工作液 |
200 |
200 |
混勻，80℃水浴30min（蓋緊，以防止水分散失），冷卻至常溫。
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試劑四 |
300 |
300 |
混勻，取200μl至微量石英比色皿或96孔板中，于530nm波長處記錄吸光值A。△A=A測定管-A空白管?？瞻坠苤灰鲆还?。
賴氨酸含量計算：
a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)條件下測定回歸方程為y = 0.0062x - 0.0212；x為賴氨酸含量（μg/ml），y為吸光值。
1.按照蛋白濃度計算
賴氨酸含量(μg/mg prot)=[(△A +0.0212)÷0.0062×V1]÷(Cpr ×V1)×1.1515
=185.73×(△A+0.0212) ÷Cpr
2.按照樣本質(zhì)量計算
賴氨酸含量(μg/g干重)=[(△A +0.0212)÷0.0062×V1]÷(W ×V1÷V2)×1.1515
=185.73×(△A+0.0212) ÷W
V1：加入反應(yīng)體系中樣本體積，0.1ml；V2：加入提取液體積，1 ml；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；W：樣本質(zhì)量，g；1.1515，校正系數(shù)。
b.用96孔板測定的計算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)條件下測定回歸方程為y = 0.0031x - 0.0212；x為賴氨酸含量（μg/ml），y為吸光值。
1.按照蛋白濃度計算
賴氨酸含量(μg/mg prot)=[(△A +0.0212)÷0.0031×V1]÷(Cpr ×V1)×1.1515
=371.45×(△A+0.0212) ÷Cpr
2.按照樣本質(zhì)量計算
賴氨酸含量(μg/g干重)= [(△A +0.0212)÷0.0031×V1]÷(W ×V1÷V2)×1.1515
=371.45×(△A+0.0212) ÷W
V1：加入反應(yīng)體系中樣本體積，0.1ml；V2：加入提取液體積，1 ml；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；W：樣本質(zhì)量，g；1.1515，校正系數(shù)。