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單寧含量檢測(cè)試劑盒（微量法 100T/96S）
| 貨號(hào) | SH0038 | 售價(jià)（元） | 1392 |
| 規(guī)格 | 100T/96S | CAS號(hào) |
- 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0038 |
單寧含量檢測(cè)試劑盒（微量法 100T/96S） |
100管/96樣 |
正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義：
單寧是一類廣泛存在于植物體內(nèi)的多元酚化合物，又稱植物多酚。具有獨(dú)特的化學(xué)性質(zhì)和多種生理活性，如能與蛋白質(zhì)、生物堿、多糖結(jié)合；能與多種金屬離子發(fā)生絡(luò)合或靜電作用；具有止血、抑制微生物、抗過敏、抗突變、抗腫瘤、抗衰老等生理活性。
測(cè)定原理：
分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NADP+和NADPH。NADPH通過PMS的遞氫作用，使氧化型噻唑藍(lán)（MTT）還原為甲瓚，570nm下檢測(cè)吸光值，從而測(cè)定NADPH含量。利用6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原NADP+為NADPH，從而檢測(cè)NADP+含量。
試劑的組成和配制：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0038-100T/96S |
Storage |
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試劑一：液體 |
4ml |
4℃ |
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試劑二：液體 |
3ml |
4℃ |
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說明書 |
一份 |
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需自備儀器和用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽和蒸餾水。
單寧的提?。?/span>
按照組織質(zhì)量（g）：蒸餾水體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml蒸餾水），充分勻漿后轉(zhuǎn)移到EP管中，80℃水浴提取30min， 8000 g，25℃離心10 min，取上清液待測(cè)。
測(cè)定步驟：
1、 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至760nm處，蒸餾水調(diào)零；試劑一和試劑二37℃預(yù)熱10min以上；
2、操作表：
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試劑名稱（μl） |
對(duì)照管 |
測(cè)定管 |
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樣本 |
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5 |
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蒸餾水 |
135 |
130 |
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試劑一 |
35 |
35 |
混勻，室溫靜置5min：
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試劑二 |
30 |
30 |
混勻，室溫靜置30min，760nm處讀取吸光值A，ΔA=A測(cè)定-A對(duì)照，對(duì)照管只要做一管。
單寧含量計(jì)算：
a.用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下：
1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y = 1.6418x +0.0134；x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/ml)，y為ΔA(A測(cè)定-A對(duì)照)。
2、按樣本鮮重計(jì)算：
單寧含量（mg /g鮮重）= [(ΔA-0.0134) ÷1.6418×V1]÷（W×V1÷V2）=0.609×(ΔA-0.0134) ÷W。
3、按樣本蛋白濃度計(jì)算：
單寧含量(mg/mg prot)= [(ΔA-0.0134) ÷1.6418×V1]÷(V1×Cpr)=0.609×(ΔA-0.0134) ÷Cpr。
V1：加入樣本體積，0.005ml；V2：加入提取液體積，1ml； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；W：樣本鮮重，g。
b.用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下：
1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y = 0.8209x+0.0134；x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/ml），y為ΔA(A測(cè)定-A對(duì)照)。
2、按樣本鮮重計(jì)算：
單寧含量(mg/g鮮重)=[(ΔA-0.0134)÷0.8209×V1]÷(W×V1÷V2)=1.218×(ΔA-0.0134) ÷W。
3、按樣本蛋白濃度計(jì)算：
單寧含量(mg/mg prot)= [(ΔA-0.0134)÷0.8209×V1]÷(V1×Cpr)=1.218×(ΔA-0.0134)÷Cpr。
V1：加入樣本體積，0.005ml；V2：加入提取液體積，1ml； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；W：樣本鮮重，g。
注意：
1、 ΔA控制在0.02-0.5范圍內(nèi)，若ΔA大于0.5，將樣本提取上清液用蒸餾水稀釋10倍后檢測(cè)，計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
2、 標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍為：0.025mg/ml-0.5mm;l。