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苯丙氨酸解氨酶(PAL) 檢測(cè)試劑盒（分光光度50T/48S）
| 貨號(hào) | SH0013 | 售價(jià)（元） | 696 |
| 規(guī)格 | 50T/48S | CAS號(hào) |
- 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0013 |
苯丙氨酸解氨酶（Phenylalnine ammonialyase，PAL） 檢測(cè)試劑盒（分光光度50T/48S） |
50管/48樣 |
正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義：
PAL（EC4. 3 1 5）廣泛存在于各種植物和少數(shù)微生物中，是植物體內(nèi)苯丙烷類代謝的關(guān)鍵酶，與一些重要的次生物質(zhì)如木質(zhì)素、異黃酮類植保素、黃酮類色素等合成密切相關(guān)，在植物正常生長(zhǎng)發(fā)育和抵御病菌侵害過(guò)程中起重要作用。
測(cè)定原理：
PAL催化L-苯丙氨酸裂解為反式肉桂酸和氨，反式肉桂酸在290nm處有最大吸收值，通過(guò)測(cè)定吸光值升高速率計(jì)算PAL活性。
組成：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0013-50T/48S |
Storage |
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提取液：液體 |
60ml |
4℃ |
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試劑一：液體 |
40ml |
4℃ |
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試劑二：粉劑 |
3瓶 |
4℃ |
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試劑三：液體 |
2.5ml |
4℃ |
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說(shuō)明書(shū) |
一份 |
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試劑二：粉劑×3瓶，4℃保存。臨用前每瓶加入4ml蒸餾水水充分溶解待用；用不完的試劑4℃保存；
自備儀器和用品：
紫外分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 ml石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
粗酶液提取：
按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。10000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
測(cè)定步驟：
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試劑名稱（μl） |
測(cè)定管 |
對(duì)照管 |
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樣本 |
20 |
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試劑一 |
780 |
800 |
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試劑二 |
200 |
200 |
混勻，30℃ 準(zhǔn)確水浴30min
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試劑三 |
40 |
40 |
混勻，靜置10min后，290nm處記錄測(cè)定管吸光值A1和對(duì)照管吸光值A2，△A=A1-A2。
注意：對(duì)照管只要做一管
PAL活性計(jì)算：
（1） 按蛋白濃度計(jì)算
單位定義：每mg組織蛋白在每ml反應(yīng)體系中每min使290nm下吸光值變化0.1為一個(gè)酶活性單位。
PAL（U/mg prot）=ΔA×V反總÷（Cpr× V樣）÷0.1÷T =17.3×ΔA÷Cpr
（2） 按樣本鮮重計(jì)算
單位定義：每g組織每ml反應(yīng)體系中每min使290nm下吸光值變化0.1為一個(gè)酶活性單位。
PAL（U/g鮮重）＝ΔA×V反總÷(W× V樣÷V樣總)÷0.1÷T =17.3×ΔA÷W
V反總：反應(yīng)體系總體積，1.04ml； V樣：加入樣本體積，0.02ml；V樣總：加入提取液體積，1 ml；T：反應(yīng)時(shí)間，30 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；W：樣本質(zhì)量，g；
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