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TEV Protease重組煙草蝕紋病毒蛋白酶

貨號(hào) wb30520-5KU 售價(jià)(元) 4599
規(guī)格 5KU CAS號(hào)
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產(chǎn)品信息

貨號(hào)

名稱

規(guī)格

價(jià)格

wb30520-1KU

TEV Protease重組煙草蝕紋病毒蛋白酶

1KU

1000

wb30520-5KU

TEV Protease重組煙草蝕紋病毒蛋白酶

5KU

4599





產(chǎn)品描述

重組型TEV蛋白酶(rTEV)是經(jīng)過(guò)基因工程改造和純化后的重組蛋白酶,不僅保持天然TEV酶的功能活性,且在廣譜的溫度范圍內(nèi)表現(xiàn)出更好的穩(wěn)定性和特異性。rTEV是一種用來(lái)切除融合蛋白上親和標(biāo)簽的常用工具酶,具有很強(qiáng)的位點(diǎn)特異性,嚴(yán)格識(shí)別七氨基酸序列EXXYXQ↓(G/S),切割位點(diǎn)在谷氨酰胺和甘氨酸/絲氨酸之間。普遍應(yīng)用的七氨基酸序列為:Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly。rTEVpH 7.0,30°C時(shí)可達(dá)到最佳活性,但在pH 6.0-8.5和溫度4-30°C的廣泛范圍內(nèi)皆有活性,使得反應(yīng)條件的選擇可根據(jù)目的蛋白的情況而靈活變動(dòng)。另外rTEV切割后也能利用其N端的 6×His標(biāo)簽,通過(guò)Ni-NTAP7151)樹脂去除,以達(dá)到純化目的蛋白的目的。

產(chǎn)品性質(zhì)

來(lái)源(Source

大腸桿菌

外觀(Appearance

無(wú)色透明液體

比活力(Specific Activity

10 U/μl

活性定義(Unit Definition

1×rTEV Buffer50 mM Tris,pH8.0,0.5 mM EDTA1mM DTT)中,30℃反應(yīng)1h,剪切>85%3 μg底物所需要的酶量定義為一個(gè)活性單位。

純化(Purification 

Ni親和純化

純度(Purity

≥95%by SDS-PAGE

產(chǎn)品組分

TEV Protease儲(chǔ)存液

10X Cleavage Buffer

25 mM Tris-HCl,pH 8.0

10 mM DTT

150 mM NaCl

500 mM Tris-HClpH 8.0

50 mM DTT

50 mM DTT

1Mm EDTA

50%V / VGlycerin

運(yùn)輸與保存方法

冰袋(wet ice)運(yùn)輸。

1. 在EP管中配制如下反應(yīng)體系,

融合蛋白

50 μg

rTEV Protease

2μl(10U/μl)

rTEV buffer 10×

10μl

ddH2O(超純水)

up to 150 μl

2.反應(yīng)時(shí)間參考表

反應(yīng)體系

不同溫度下參考反應(yīng)時(shí)間

4°C

20°C

30°C

反應(yīng)時(shí)間

15-16h

6h

2h

待測(cè)融合蛋白100μg,加入TEV Protease 2μl,4℃反應(yīng)16小時(shí),取酶切前后樣品SDS-PAGE檢測(cè),如右圖所示 >90% 融合蛋白被切割。

TEV Protease活性測(cè)試


長(zhǎng)期儲(chǔ)存于 -80℃,可保存2年;或小量分裝后保存于 -20℃,可保存6個(gè)月,避免反復(fù)凍融。10X rTEV buffer (10×)Buffer置于 -20℃保存。

注意事項(xiàng)

為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。


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