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產(chǎn)品介紹

吖啶橙是一種熒光色素，其檢測(cè)激發(fā)濾光片波長(zhǎng)488nm，阻斷濾光片波長(zhǎng)515nm。它與細(xì)胞中DNA和RNA結(jié)合量存在差別，可發(fā)出不同顏色的熒光，與DNA結(jié)合量少發(fā)綠色熒光，與RNA結(jié)合量多發(fā)桔黃色或桔紅色熒光。該染料具有膜通透性，能透過(guò)細(xì)胞膜，使核DNA和RNA染色。因此，在熒光顯微鏡下觀察，吖啶橙可透過(guò)正常細(xì)胞膜，使細(xì)胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光；而在凋亡細(xì)胞中，因染色質(zhì)固縮或斷裂為大小不等的片斷，形成凋亡小體。吖啶橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光，或黃綠色碎片顆粒；而壞死細(xì)胞黃熒光減弱甚至消失。吖啶橙AO常與溴化乙啶EB合用雙染，因EB只染死細(xì)胞使之產(chǎn)生桔黃色熒光，由此可區(qū)分出正常細(xì)胞、凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞。它還可以用作移碼突變的誘變劑，能鑲嵌于兩個(gè)相鄰的堿基對(duì)之間，這樣在DNA復(fù)制過(guò)程中，會(huì)使DNA鏈增加或缺失一個(gè)堿基，造成移碼突變。

 產(chǎn)品性質(zhì)

 中文名稱：堿性橙 14； 丫啶橙;3,6-雙(二甲氨基)吖啶

英文名稱：Basic Orange 14；Basic Orange 14; C.I. 46005; 3,6-Bis(dimethylamino)acridine zinc chloride hydrochloride

化學(xué)式：C17H19N3

分子量：369.96

CAS：10127-02-3

溶解性：水溶

光譜特性：Ex / Em =490 - 495 nm

存儲(chǔ)條件：4 ℃避光保存。

使用方法

AO能與無(wú)機(jī)酸形成鹽，具有綠色熒光。如果再稀釋的話，便水解成游離的AO，而呈現(xiàn)紫色熒光。

吖啶橙/溴化乙錠雙熒光染色測(cè)定PC12細(xì)胞凋亡（acridine orange/ethidium bromide, AO/EB）：

（1）細(xì)胞爬片：在6孔培養(yǎng)板中預(yù)先置入玻璃蓋玻片，接種細(xì)胞懸液，干預(yù)后，予95%乙醇固定15分鐘，微干，然后準(zhǔn)備熒光染色。將100mg/L溶于PBS的吖啶橙和100mg/L溶于PBS的溴化乙錠各5μl（臨用前混合加入，加樣量宜小，有時(shí)各2μl-5μl足夠，量太大容易形成細(xì)胞凋亡的假陽(yáng)性），在照相前混勻后加入，輕輕吹打，30秒后用激光共聚焦顯微鏡觀察照相。（有人用15mg吖啶橙溶于100ml pH6.8的PBS中過(guò)濾，避光保存）計(jì)取5個(gè)視野，共100個(gè)細(xì)胞中凋亡細(xì)胞百分?jǐn)?shù)。

（2）如制成細(xì)胞懸液：取100μl PBS稀釋的細(xì)胞懸液，加2μl的染色液，其中AO/EB，各含100μg/ml，加入染料30秒后觀察攝像。

產(chǎn)品相關(guān)：