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膠原酶NB4 標(biāo)準(zhǔn)級別(Collagenase NB 4 Standard Grade)

貨號 J1631 售價(元) 1680
規(guī)格 500mg CAS號 9001-12-1
  • 產(chǎn)品簡介
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產(chǎn)品信息

貨號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

價格

J1611

膠原酶NB4 標(biāo)準(zhǔn)級別(Collagenase NB 4 Standard Grade)

100mg

420

J1631

膠原酶NB4 標(biāo)準(zhǔn)級別(Collagenase NB 4 Standard Grade)

500mg

1680

產(chǎn)品簡介

膠原酶(CollagenaseCAS NO. 9001-12-1)是一種蛋白水解酶,常用來消化細(xì)胞外基質(zhì)蛋白。作為一種肽鏈內(nèi)切酶,膠原酶特異性識別Pro-X-Gly-Pro序列(高頻出現(xiàn)在膠原蛋白,很少在其他蛋白中發(fā)現(xiàn))并切割氨基酸(X)和甘氨酸(Gly)之間的肽鍵。不同于其他蛋白酶,膠原酶是唯一一種可識別并降解具三股超螺旋結(jié)構(gòu)的天然膠原纖維,這種膠原纖維廣泛存在結(jié)締組織中。

沃博生物提供的膠原酶NB4標(biāo)準(zhǔn)級別(Collagenase NB 4 Standard Grade),來源于溶組織梭菌(Clostridium histolyticum),是一種粗制的膠原酶,含有膠原溶解酶和其他酶活性包括梭菌蛋白酶和中性蛋白酶,這些酶比例的平衡確保溫和和有效的組織消化。本品膠原酶活性≥0.10 U/mgPZ),適用于人和動物組織各種細(xì)胞的分離,組織類型包括:脂肪組織、軟骨、皮膚、胎盤、臍帶組織和肺,還適用于細(xì)胞傳代培養(yǎng),比如胚胎干細(xì)胞。

使用步驟

一、儲存液制備

膠原酶NB4標(biāo)準(zhǔn)級別溶于所有緩沖液(通常用于細(xì)胞分離)的濃度高達150mg/ml。酶溶液需連續(xù)放在冰上。由于膠原酶和一些二級蛋白酶依賴于Ca2+,因此建議在緩沖液內(nèi)加入≥2mM Ca2+,且完全不能含鈣離子螯合劑(比如EDTA)。

重溶的膠原酶NB4溶液需經(jīng)0.22μm濾膜過濾除菌,按照單次用量分裝,并置于-20℃凍存。如果避免反復(fù)凍融,可穩(wěn)定保存1年。注意經(jīng)0.22μm濾膜建議選擇具低蛋白結(jié)合特性的膜(比如,醋酸纖維素,PVDF,或PES)。

二、工作液制備

用緩沖液稀釋儲存液到需要的膠原酶濃度,工作液需一直保存在冰上直到使用。

三、組織消化

對以下應(yīng)用的建議起始濃度:脂肪組織(人或鼠類)—0.2-0.3 PZ U/ml;軟骨(人或鼠類)—0.3-0.4 PZ U/ml;總的來說,具體膠原酶濃度取決于組織類型、來源和分離步驟。本膠原酶的最佳條件為37℃,pH 7.4

四、失活和抑制劑

比如,通過降低反應(yīng)溫度或稀釋酶溶液能夠減低消化水平。

pH能可逆失活膠原酶活性,低pH不可逆失活膠原酶活性。抑制劑包括半胱氨酸或螯合劑如EDTA。

注意事項

1. 本膠原酶NB4絕不可直接用在人身上。

2. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

膠原酶類別特征:

膠原酶類型

組分特征和應(yīng)用

I型膠原(Type1) J1211

相對均量的多種酶活(包括膠原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性) ,通常用作上皮組織肝、肺、脂肪和腎上腺組織的原代細(xì)胞制備

II型膠原酶( Type2)J1311

含更高的梭菌蛋白酶活性,通常用作心臟、骨、肝、胸腺、唾液腺和軟骨等組織的原代細(xì)胞制備

III型膠原酶( Type3) J1411

含較低的次級蛋白酶水解活性;常用于乳腺組織的原代細(xì)胞制備

V型膠原酶( Type4)J1511

含較低的胰酶活性;通常用于胰島細(xì)胞制備,和維持受體完整性比較重要的其他研究

膠原酶NB (標(biāo)準(zhǔn)級別) J1611 

相對均量的多種酶活(包括膠原酶、梭菌蛋白酶、中性蛋白酶活性),作用溫和。廣譜適用人和動物組織各種細(xì)胞的分離,可用作脂肪組織、軟骨、皮膚、胎盤、臍帶組織和肺的原代細(xì)胞制備;也適用細(xì)胞傳代,比如胚胎干細(xì)胞

為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作

運輸與保存方法

-20℃長期保存,避光防潮密閉干燥。


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